實驗室分光光度計是物質(zhì)中的分子和原子在入射光中吸收特定波長的光能，從而發(fā)生分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種材料不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，光能量的吸收，它不會是相同的結(jié)果，每個材料都有其*的、固定的吸收光譜曲線，根據(jù)一些特征吸收光譜波長的吸光度的歧視或確定材料的內(nèi)容，這是定性和定量的光度分析的基礎(chǔ)。分光光度分析是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究其組成、結(jié)構(gòu)和相互作用的有效手段。
實驗室分光光度計的定量分析是基于朗伯-比爾定律。即物質(zhì)在一定濃度下的吸光度與吸收介質(zhì)的厚度成正比，其數(shù)學(xué)表達(dá)式如下：
Uv紫外可見分光光度計的復(fù)合光源鎢燈，通過步進(jìn)電機(jī)驅(qū)動控制氘燈鏡M 1,反映出入射狹縫，手牽手在單色儀，光柵衍射的單色光通過聚焦，準(zhǔn)直鏡M2融合通過出口狹縫，梁達(dá)到砍伐裝置時，在一段時間內(nèi)的光成為參考光路，另一段時間光傳輸成為樣本路徑。兩束光交替照亮檢測器（光電倍增管）。
實驗室分光光度計測試完成
取下托盤，擦拭樣品室，加入干燥劑，關(guān)閉樣品室蓋。關(guān)閉儀器電源，蓋上儀器防塵蓋。使用小杯后，立即用蒸餾水或有機(jī)溶液沖洗，并用柔軟干凈的紗布擦拭污漬。
實驗室分光光度計是用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量和定性分析的儀器。通過測量光在特定波長或特定波長范圍內(nèi)的吸收，對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。常用的波長范圍為：（1）紫外區(qū)200 ~ 400nm，（2）可見光區(qū)400 ~ 760nm，（3）紅外區(qū)2.5 ~ 25m （4000cm<-1> ~ 400cm<-1>）。所用儀器有紫外分光光度計、可見光分光光度計（或比色計）、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證計量的精密度和準(zhǔn)確度，所有儀器應(yīng)按照國家計量檢定規(guī)程或本附錄的規(guī)定進(jìn)行定期檢定和檢定。
實驗室分光光度計是利用分光光度法，通過測定被測物質(zhì)在某一特定波長或某一波長的光的吸收情況，對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。
實驗室分光光度計的基本原理是相似的。它們都使用一種可以產(chǎn)生多種波長的光源，并通過一系列分光光度計產(chǎn)生特定波長的光源。光源通過被測樣品后，部分光源被吸收。通過測量樣品的吸收值，經(jīng)計算可轉(zhuǎn)換為樣品的濃度。樣品的吸收值與樣品的濃度成正比。
分光光度計使用一種可以產(chǎn)生多種波長的光源。通過一系列分光光度儀，產(chǎn)生了特定波長的光源。光源通過被測樣品后，部分光源被吸收，計算出樣品的光吸收值，再將光吸收值轉(zhuǎn)化為樣品的濃度。樣品的吸收值與樣品的濃度成正比。
使用范圍
實驗室分光光度計任何具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物都可以根據(jù)特定吸收波長測定的吸光度進(jìn)行藥物的鑒別、純度檢測和含量測定。
實驗室分光光度計使用注意事項
?。?）空白溶液和測試產(chǎn)品溶液必須澄清，不得混濁。如遇渾濁，應(yīng)提前過濾，將原濾液丟棄。
?。?）除另有規(guī)定外，測試產(chǎn)品溶液應(yīng)以溶劑瓶為空白對照，使用1cm石英吸收池進(jìn)行測定。
?。?）測試在規(guī)定的吸收峰波長2nm范圍內(nèi)的幾個點(diǎn)的吸光度，檢查測試產(chǎn)品的吸收峰波長位置是否正確。除另有規(guī)定外，吸收峰波長應(yīng)在本品種規(guī)定波長2nm以內(nèi)；否則，應(yīng)考慮樣品的真實性、純度和儀器波長的準(zhǔn)確性，并以zui吸附量較大的波長作為測量波長。
?。?）一般測試溶液吸光度讀數(shù)，誤差較小，在0.3 ~ 0.7之間。
?。?）吸收池應(yīng)選擇配對，否則會引入測量誤差。如果兩個吸收池在規(guī)定波長下的透過率差小于0.5%，則兩個吸收池匹配。如有必要，兩個吸收池之間的誤差應(yīng)從終的zui測量中扣除。
光電倍增管檢測到的信號通過前置放大器和驅(qū)動卡傳輸?shù)轿C(jī)控制器。分光光度法是分析儀器中常用、有效的方法之一。幾乎每個分析實驗室都依賴于紫外可見分光光度計。分光光度法具有以下主要特點(diǎn)。
1. 高靈敏度
由于大量新的色素的合成和應(yīng)用研究取得可喜進(jìn)展，先進(jìn)元素測定的敏感性，尤其是multi-complex和各種表面活性劑的應(yīng)用研究，許多元素的摩爾吸光系數(shù)增加從幾萬到幾十萬。
是有選擇性的
目前，只要控制好顯色條件，就可以用分光光度法測定鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素。
3.精度高
對于普通分光光度法，其濃度測定的相對誤差在l ~ 3%范圍內(nèi)。采用差示分光光度法測定，誤差可減小到0。X %。
4. 適用濃度范圍廣
實驗室分光光度計可以從常數(shù)（1%-50%）鍺用微分法測定（10.8-10.6%）（預(yù)濃縮后）。
5. 成本低，操作簡單，運(yùn)行速度快，應(yīng)用范圍廣
該方法可用于紫外可見區(qū)吸收的各種無機(jī)和有機(jī)物的測定。到目前為止，除了少數(shù)放射性元素和惰性元素外，這種方法幾乎適用于周期表上的所有元素。光度法在上發(fā)表的分析論文中約占28%，在國內(nèi)發(fā)表的分析論文中約占33%。
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更新時間：2019-04-23
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